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血清學檢測在豬傳染病防控中的應用

[ 更新時間：2013-08-16 ]

血清學檢測在豬傳染病防控中的應用

血清學檢測就是根據(jù)豬群規(guī)模，在特定的時期對各階段豬群按比例采集血清樣品，在實驗室利用標準化檢測試劑盒，檢測樣品的血清抗體滴度，并采用科學的方法分析豬群疫病的流行規(guī)律以及動態(tài)學過程，評價豬群免疫狀態(tài)，為豬場管理者提供數(shù)字化的信息，科學防控豬傳染病。

1 血清學檢測的目的

1.1 引進新豬群

在引進新豬群之前，進行群體血清學檢測，避免引入陽性帶毒個體。

1.2 預測免疫接種時間

在豬病防控中，恰當?shù)拿庖呓臃N時間往往是有效免疫的關鍵，使用疫苗尤其是活苗的時候，一定要考慮母源抗體的影響，最可靠和可行的方法就是通過血清學方法來測

定母源抗體的消長，確定免疫接種的最佳時機。首次免疫接種時抗體的轉(zhuǎn)陽率與ELISA抗體的阻斷率呈明顯的負相關，即免疫前抗體水平越高(體現(xiàn)為阻斷率的上升)，免疫效果越差。當母源抗體的阻斷率高于70％時，免疫很難奏效。

1.3 疫苗效果的評價

疫苗生產(chǎn)廠家繁多，質(zhì)量參差不齊，疫苗的運輸、管理、保存、注射等諸多環(huán)節(jié)都會影響疫苗的效力，通過血清學檢測可以了解免疫注射后豬群體內(nèi)是否產(chǎn)生保持抵抗

豬病強毒攻擊的有效抗體，從而科學合理地做好免疫。

1.4 分析疫病發(fā)生的動態(tài)

通過定期的分階段、分群體血清學檢測能掌握疫病的發(fā)展動態(tài)，比如可以了解在種豬群中藍耳病是否處于“穩(wěn)定狀態(tài)”、是否存在先天性感染和早期感染、生長育肥文章編號：1004—5090(2013)02—0024—02豬在什么時間感染藍耳病、藍耳病是否和喘氣病同時發(fā)

生，從而在敏感時期采取特定的干預措施，以避免或降低疫病造成的損失。

1.5 疫病的診斷

雖然血清學檢測能成功地用于免疫評估，但也有一些直接檢測抗原或能夠區(qū)分野毒和免疫抗體的方法，如herdchek豬瘟抗原ELISA試劑盒、CHEKIT豬瘟抗原試劑盒等能夠直接檢測到豬瘟病毒的抗原成分，豬偽狂犬病病毒gI抗體試劑盒、CHEKIT口蹄疫3ABC抗體試劑盒等能夠?qū)⒚庖呖贵w和野毒抗體很好區(qū)分。另外，雖然有一些方法既可以檢測到免疫抗體和感染抗體，但由于多數(shù)情況下野毒抗體與免疫抗體往往在滴度或特性上存在區(qū)別差別，

所以也可以提示養(yǎng)殖者是否存在野毒感染，如在使用Herdchek豬瘟抗體試劑盒來檢測血清抗體時，研究者發(fā)現(xiàn)，將阻斷率在70％以上的血清進一步稀釋到40倍，免疫血清大多會呈現(xiàn)陰性結果，而多數(shù)人工感染豬只的血清則仍然呈現(xiàn)陽性結果。

1.6 考察豬群的動態(tài)學變化

豬場的生產(chǎn)總是存在波動，如果豬場有生產(chǎn)正常時的血清學檢測資料，再將生產(chǎn)異常時的資料與常規(guī)資料檔案進行對比，很容易查到出現(xiàn)問題的原因。另外如果在豬群發(fā)病時分別采取發(fā)病期和恢復期的血清，通過分析抗體滴度的變化，也有利于進行疫病的診斷與分析。

1.7 疫病的凈化

血清學檢測用于疫病凈化的經(jīng)典案例是偽狂犬病。由于gE基因缺失疫苗的應用使得我們可以通過血清學方法區(qū)分疫苗注射動物和野毒感染動物，通過與gE基因缺失疫苗配套的gE—ELISA試劑盒的檢測與分析，科學指導豬場偽狂犬病的凈化過程，歐盟許多國家以及美國偽狂犬病的凈化已經(jīng)取得成功，在中國同樣有許多豬場也獲得成功。另外口蹄疫也可以通過非結構蛋白ELISA方法區(qū)分野毒感染動物和疫苗注射動物，這極大方便了豬場的診斷和流行病學分析。

2 血清學檢測采樣與送檢方法

2.1 采樣分組

通常采樣應包括種豬群和生長豬群。種豬群應包括公豬、不同胎次的經(jīng)產(chǎn)母豬以及已經(jīng)選育的后備豬。生長豬根據(jù)周齡不同可分為6～7組，每組間隔3～4 W，根據(jù)檢測疫病的種類不同應有所調(diào)整，比如對于藍耳病、偽狂犬病、豬瘟等可分別采集4、7、10、13、l6、20、24周齡生長豬的血清樣品。

2.2 采樣數(shù)量

采樣數(shù)量與豬群的規(guī)模大小相關，通常是以基礎生產(chǎn)母豬的數(shù)量來確定。一般按基礎生產(chǎn)母豬數(shù)量的10％～15％抽樣，進行血清學檢測。

2.3 器材

為便于血清學檢測，應準備一些基本的器材，比如低速離心機、一次性注射器、記號筆、無菌試管、1．5 ml離心管、泡沫箱、冰袋等。

2.4 采樣方法

豬血清樣品的采集通常選用頸靜脈、前腔靜脈，也可選耳靜脈。用一次性注射器無菌采血3 ml～5ml，置無菌試管中擺成斜面，室溫下靜置2～4 h(防止陽光曝曬)，待血清充

分析出后，或離心分離血清，用無菌注射器吸出血清，注入滅菌離心管中，蓋緊離心管蓋，通常情況下進行常規(guī)的檢測每份血清樣品總量應不少于1 ml。

2.5 樣品的記錄應盡量詳細

送往實驗室的樣品應有一式二份的送檢報告，一份隨樣品送實驗室，另一份留存?zhèn)浒浮悠酚涗洃ㄒ韵聝?nèi)容：豬場的名稱地址；飼養(yǎng)品種及其數(shù)量；飼養(yǎng)方式、是否自繁自養(yǎng)、斷奶日齡、各個豬群的免疫程序和免疫日期、所用疫苗的種類以及是否發(fā)病及用藥情況等。

2.6 血清樣品的運送

血清樣品必須在24 h內(nèi)放在4℃左右的容器中送到實驗室，24 h內(nèi)不能送到實驗室的，需要在運送過程中保持樣品溫度處于一20"C以下，這樣才能保證檢測結果的準確。

本文內(nèi)容摘自《河南畜牧獸醫(yī) 2013年（第34卷）第2期》

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